P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体的构建及其体外表达

• 作者: 张迎春 智发朝 王继德 钟长青 龙靖华
• 来源期刊: 胃肠病学
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,NOD2/CARD15 诱变,定点 转染
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 331-334
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-7125.2007.06.004

摘要

背景:NOD2/CARD15基因序列单核苷酸多态性(SNP)与欧美人群的克罗恩病(CD)明显相关,其中R702W、G908R和3020insC 3个SNP位点与CD的相关性尤为显著.而日本、韩国以及我国香港和浙江地区的研究均未发现上述3个SNP的改变,但最近研究发现了可能与中国人CD相关的P268S突变.目的:构建P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体和体外转染体系,为研究突变型NOD2/CARD15的功能提供实验基础.方法:应用定点诱变技术构建P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转染技术瞬时转染人胚肾细胞HEK293T,以蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HEK293T细胞NOD2/CARD15的表达.结果:经克隆、酶切、测序证实获得P268S突变型NOD2/CARD15基因,突变载体转入HEK293T细胞后,NOD2/CARD15有效表达.结论:成功构建了P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体,阳离子脂质体是人胚肾细胞有效的体外转染体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王继德	南方医科大学附属南方医院消化病研究所	48	262	10.0	13.0
2	智发朝	南方医科大学附属南方医院消化病研究所	122	907	14.0	23.0
3	龙靖华	南方医科大学附属南方医院消化病研究所	3	12	2.0	3.0
4	钟长青	南方医科大学附属南方医院消化病研究所	4	12	2.0	3.0
5	张迎春	南方医科大学附属南方医院消化病研究所	8	50	3.0	7.0