水稻重复序列RRD3:植物启动子及其在RNA干涉中的应用

• 作者: 仲健 刘兵 张党权 王宏斌 王金发
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 农学
• 关键词: RRD3 启动子 GUS组织化学分析 GUS荧光定量分析 RNA干涉
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 258-266
• 页数: 9页
• 分类号: S5
• 字数: 554字
• 语种: 中文

摘要

RRD3是通过复性动力学从水稻基因组中克隆到的一个中度重复序列,序列分析揭示其含有多个保守的启动子元件,包括4个TATA-boxes和CAAT-box,在Escherichia coli及哺乳动物表达系统中均表现出启动子活性.我们将RRD3片段插入到植物启动子捕获载体pCAMBIA1391Z中,检测RRD3片段是否在植物中也有启动子活性,转基因烟草再生植株和水稻愈伤组织均显示了gusA基因的表达,表明其在单子叶和双子叶植物中均可行使启动子功能.基于RRD3的双效启动子特性,我们设计并构建了植物通用双元RNAi载体pCRiRRD3,适于进行植物的RNA干涉实验研究.我们在植物RNAi载体pCRiRRD3的内含子(200 bp)的上下游分别引入了2个多克隆位点,方便了正义及反义片段的接入.转基因烟草植株的GUS组织化学及荧光定量分析表明该载体可有效进行RNA沉默.这些研究结果表明,利用单子叶和双子叶双效活性的RRD3启动子而构建的植物RNAi载体,可同时有效地应用于大部分单子叶和双子叶植物的RNAi实验及研究.