α-HNP-1转基因细胞系的建立

• 作者: 吴建英 张德玲 杨悦 欧阳静萍 蒋思文 陶弼菲 高其双 黄海军
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 人α-防御素-1 真核表达载体 ES细胞 上皮细胞系 稳定转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 113-116
• 页数: 4页
• 字数: 2914字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-5464.2007.06.029

摘要

目的 构建稳定表达人α-HNP-1的转基因细胞系,为稳定生产α-HNP-1并将其应用于医药开发提供生产细胞源.方法 真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNP-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染昆明白小鼠胚胎干细胞来源的上皮细胞,通过不同浓度的G418加压筛选,建立稳定转染的胚胎干细胞来源的上皮细胞系,用RT-PCR及抑菌试验检测α-HNP-1的表达.结果 建立了稳定转染的ES来源的上皮细胞系,成功地表达目的 基因,其培养上清液及细胞冻融液具有抑菌作用,结论 真核表达载体稳定转染胚胎干细胞来源的上皮细胞系,为进一步研究α-HNP-1的功能奠定了基础.