O型口蹄疫病毒OA58株3C基因的克隆与真核表达

• 作者: 丛国正 刘萍 常惠芸 易华山 杨孝朴 林彤 沈小燕 独军政 王光华 谢庆阁 邵军军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 3C基因 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 20-23
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 3327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.01.007

摘要

利用RT-PCR技术扩增获得了长度约640 bp的口蹄疫病毒目的基因,回收片段后与pMD18-T载体进行连接,测序结果表明获得了口蹄疫病毒3C基因.将重组质粒pMD18-3C与表达载体pEGFP-N1分别用BamH Ⅰ+Xho Ⅰ双酶切后,进行定向亚克隆,对重组表达质粒pEGFP 3C进行PCR、酶切鉴定及DNA测序,结果表明重组表达质粒所含的3C基因读码框正确.用pEGFP-3C转染BHK-21细胞,荧光显示目的基因EGFP发出绿色荧光;对3C转录的mRNA进行RT-PCR鉴定,证实3C基因在BHK-21细胞中得到了表达.