杨树ISSR反应体系的建立及正交设计优化

• 作者: 吴大强 孙志娟 汪结明 蔡诚 项艳
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 杨树 ISSR 正交设计 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 470-473,513
• 页数: 5页
• 分类号: S7
• 字数: 3398字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8551.2007.05.010

摘要

采用正交设计的方法,对杨树ISSR-PCR反应中5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物)在4个水平上进行优化试验.建立了适合杨树的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有1×buffer,0.12mmol/L dNTP,0.4μmol/L引物,3.5 mmol/L Mg2+,1.5U TaqDNA聚合酶和40ng模板DNA.对杨树ISSR-PCR最佳反应体系的退火温度进行梯度试验,发现引物W95142的最适退火温度为56.1℃,且最适退火温度因引物而异.这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术进行杨树种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	项艳	安徽农业大学林学与园林学院	65	674	16.0	22.0
2	蔡诚	安徽农业大学林学与园林学院	9	153	6.0	9.0
3	吴大强	安徽农业大学林学与园林学院	8	152	6.0	8.0
4	汪结明	安徽农业大学林学与园林学院	10	139	6.0	10.0
5	孙志娟	安徽农业大学林学与园林学院	3	74	3.0	3.0