问号钩端螺旋体中一个新的OmpA家族蛋白抗原性及保守性研究

• 作者: 杨宏亮 杨杨 林玮 胡宝瑜 董珂 谭立志 郭晓奎
• 来源期刊: 微生物与感染
• 学科: 医学
• 关键词: 问号钩端螺旋体 OmpA 疫苗候选基因
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 202-205
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2007.04.004

摘要

目的 克隆表达和鉴定问号钩端螺旋体(L.interrogans)黄疸出血群赖型赖株中一个新的外膜蛋白(Omp)A家族基因LA0301,研究LA0301编码蛋白的抗原性和在15个钩端螺旋体(简称钩体)血清群代表株中的保守性,探讨其在疫苗研究中的意义.方法 生物信息学软件分析预测LA0301的特征.构建原核表达重组体pQE31-LA0301,经IPTG诱导后用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDs-PAGE)及蛋白质印迹法(Western blot)鉴定表达情况.用表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,Western印迹检测其免疫反应性和在不同血清型钩体中的保守性.酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹检测兔抗钩体全菌血清中的LA0301编码蛋白的抗体.结果 生物信息学预测结果显示,LA0301具有OmpA家族的结构域.克隆表达了重组质粒pQE31-LA0301,重组蛋白能刺激BALB/e小鼠产生特异性抗体,效价为1:32000.在兔抗钩体全菌血清中检测到特异的LA0301蛋白抗体,并在15个血清群的代表株钩体中均可检测到LA0301蛋白.结论 LA0301蛋白是问号钩体中一个新的OmpA家族蛋白,具有良好的抗原性和保守性,并且能在钩体感染的过程中刺激机体产生相应的抗体.为进一步研究钩体新型疫苗候选基因奠定了基础.