A组人轮状病毒NSP3基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 于洋 文喻玲 曹志亮 赵庆欢 陈元鼎
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 轮状病毒 NSP3 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 388-391
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|R392.1
• 字数: 3822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.03.008

摘要

目的:获得轮状病毒NSP3基因的表达产物及其抗血清.方法:将TB-Chen株轮状病毒NSP3基因插入质粒pETL,构建重组表达质粒pET-NSP3,并转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白NSP3;用凝胶分离回收的方法纯化该蛋白,免疫豚鼠制备该蛋白的抗血清.结果:构建了重组表达质粒pET-NSP3,并在大肠杆菌中高效表达了重组蛋白NSP3,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的28.6%;有效地纯化了目的蛋白并制备了该蛋白的抗血清,Western印迹表明该抗血清能与重组蛋白NSP3发生特异性免疫反应.结论:通过质粒pETL能高效表达轮状病毒NSP3蛋白,该重组蛋白具有较好的免疫反应性,为进一步研究其结构、功能及免疫学性质奠定了基础.