宫颈癌相关BLCAP基因的原核表达及条件优化

• 作者: 伍欣星 俞娟 左泽华 解庭波 赵旻
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 BLCAP基因 原核表达 条件优化
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4574字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.01.004

摘要

目的 利用大肠埃希菌表达系统表达宫颈癌相关BLCAP基因,并优化表达条件.方法 利用PCR技术从逆转录病毒重组载体pL(BLCAP)SN中扩增宫颈癌相关BLCAP基因,将其插入到原核表达载体pET-32(a)中,从而构建原核表达重组质粒pET-32(a)-BLCAP,随后将阳性重组质粒转化到表达宿主菌中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,所表达的带有His标签目的融合蛋白经Ni2+亲和层析纯化回收,并采用SDS-PAGE和Western印迹对目的蛋白进行分析和鉴定.结果 构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,含有重组质粒的表达宿主菌经过IPTG诱导表达了分子量约为28 ku的融合蛋白,并经优化确定了最佳的诱导表达条件.结论 成功构建了pET-32(a)-BLCAP原核表达质粒,表达并经纯化得到了BLCAP目的蛋白,为研究该蛋白的性质及其制备针对该蛋白的抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	伍欣星	武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室	51	117	6.0	7.0
2	赵旻	武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室	39	136	5.0	9.0
3	俞娟	武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室	5	3	1.0	1.0
4	解庭波	武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室	10	232	4.0	10.0
6	左泽华	武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室	10	24	3.0	3.0