反义端粒酶RNA基因对肝癌细胞的抑制作用

• 作者: 刘吉勇 刘娜 赵淑磊 马进财
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 端粒酶 逆转录病毒载体 反义RNA 肝细胞癌
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 143-147
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.02.009

摘要

目的:研究逆转录病毒载体介导的反义端粒酶RNA基因对肝癌细胞的抑制作用,探讨通过抑制端粒酶活性治疗肝细胞癌的有效途径.方法:采用电穿孔法将携带正反义端粒酶RNA基因的逆转录病毒载体导入PT67包装细胞,G418筛选获得稳定产病毒细胞株,收集逆转录病毒上清并感染人肝癌HepG2细胞,G418筛选获得稳定转染细胞克隆并扩增培养,经PCR鉴定后,通过MTT法分别检测转染正反义端粒酶RNA基因组肝癌细胞(HepG2-hTR-EcoRⅠ和HepG2-hTR-BamHⅠ)以及未转染端粒酶RNA基因组细胞(HepG2)的生长,免疫荧光化学检测肝癌细胞增殖, TRAP-PCR-ELISA法检测细胞的端粒酶活性,流式细胞术检测各组细胞所处的细胞周期及凋亡率.结果:基因转染后经PCR扩增可于约500 bp处检测到目的基因的表达.转染反义端粒酶RNA基因的HepG2-hTR-BamHⅠ组细胞生长受到明显抑制;抗中性粒细胞核增殖抗原(PCNA)表达减少;实验组端粒酶活性为(2.31±0.16),较HepG2-hTR-EcoRⅠ组(3.24±0.20)及HepG2组细胞(3.22±0.17)明显下降(P＜0.01);流式细胞术检测显示实验组细胞的凋亡率为(9.58±1.38)%,与对照组相比差别具有显著性(P＜0.01);实验组细胞出现G2/M期阻滞.结论: 端粒酶RNA是端粒酶活性表达的一个重要组成部分,通过反义技术下调其表达能够抑制肝癌细胞生长增殖,并诱导其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘娜	山东大学山东省立医院消化科	62	252	10.0	13.0
2	刘吉勇	山东大学山东省立医院消化科	27	251	8.0	15.0
3	赵淑磊	山东大学山东省立医院消化科	3	5	2.0	2.0
4	马进财	山东大学山东省立医院消化科	3	7	2.0	2.0