家蚕精子介导转基因技术体系的优化

• 作者: XIA Ding-Guo 唐顺明 夏定国 张业顺 张国政 沈兴家 赵浩勤 郭锡杰
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 精子介导转基因 交尾囊注射 转座子载体DNA PCR检测
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 201-206
• 页数: 6页
• 分类号: S881.2|Q78
• 字数: 5219字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2007.02.007

摘要

为了构建高效的家蚕转基因技术,对采用piggyBac转座载体的家蚕精子介导转基因的主要技术参数进行优化,结果表明外源DNA的稀释剂和注射方式对导入效率影响较大,G0代未整合的外源DNA在5龄期前基本被降解破坏.推荐的家蚕精子介导基因转移技术方案为:处女蛾交尾囊注射6～8 μL 以0.1×TE 稀释的2 g/L piggyBac转座子载体DNA后正常交配产卵,根据G0代5龄期及蛾期PCR检测标记基因为阳性的蛾区自交,G1代阳性个体自交以获得纯合后代.