HSV-tk/GCV自杀基因系统与重组TNF联合杀伤肿瘤细胞的光学成像检测

• 作者: 刘曼西 张智红 林居强 田慧 骆清铭
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 自杀基因 肿瘤坏死因子 胸苷激酶-绿色荧光蛋白 光学成像 涎腺腺样囊性癌
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 411-417
• 页数: 7页
• 分类号: O439|R979.1
• 字数: 3835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2007.04.006

摘要

目的:应用光学成像方法检测HSV-tk/GCV自杀基因系统与重组改造的人肿瘤坏死因子(recombinant human tumor necrosis factor,rmhTNF)的联合使用,对人涎腺腺样囊性癌细胞(adenoid cystic carcinoma,ACC-M)的杀伤效率.方法:实验分为四组,细胞模型对照组、单纯HSV-tk/GCV自杀基因系统治疗组、rmhTNF处理组、自杀基因联合rmhTNF治疗组.将稳定表达胸苷激酶-绿色荧光蛋白(thymidine kinase-green fluorescen protenin,tk-GFP)的ACC-M细胞(ACC-M-tk-GFP)按5 000个/孔接种到96孔板中,24 h后给药治疗;分别于加药前、给药后6 h、给药后24 h进行荧光成像.检测绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的荧光用于准确显示胸苷激酶(tk)基因表达的肿瘤细胞,检测碘化丙啶(propidium iodide,PI)的荧光用于显示死亡的肿瘤细胞.通过细胞的透射图及其PI和GFP荧光图像,分别计算tk+细胞和tk-细胞的死亡率.结果:HSV-tk/GCV自杀基因系统与rmhTNF联合治疗组的细胞在加药后6 h就已经出现细胞死亡迹象,而单纯HSV-tk/GCV自杀基因系统治疗组的细胞在加更昔洛韦(ganciclovir,GCV)后24 h才出现细胞死亡,单纯rmhTNF治疗组在加药后24 h还没有细胞死亡发生.对于给药后24 h的tk+细胞死亡率,联合治疗组(85.88%)明显高于GCV(38.13%)和rmhTNF单独治疗组(2.97%),并且联合治疗组给药24 h后会引发部分tk-细胞死亡(9.83%).结论:HSV-tk/GCV自杀基因系统与rmhTNF联合治疗具有显著的协同抗肿瘤效应,能够明显提高对肿瘤细胞的杀伤率;结合光学成像方法,能为更直观方便地检测各组药物分别对tk+细胞和tk-细胞的杀伤率,可为深入研究"旁观者效应"提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	骆清铭	华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室	125	1061	18.0	22.0
2	刘曼西	华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室	35	316	9.0	16.0
3	张智红	华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室	16	83	6.0	9.0
4	田慧	华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	林居强	华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0