人源抗乙型肝炎病毒表面抗原基因工程IgG全抗体的表达、纯化及初步鉴定

• 作者: 余模松 周志军 张爱华 彭祥兵 梁米芳 詹骞 闭兰 黄仕和
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙型肝炎病毒表面抗原 IgG 基因工程抗体 杆状病毒 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 873-876
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3270字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.12.001

摘要

目的 对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体进行表达、纯化及初步鉴定.方法 用含Fc片段抗-HBsAg Fab抗体基因的载体pAC-HBs-Fc,与杆状病毒线性DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组抗-HBsAg的全抗体.以不同浓度的HBsAg包被酶标板孔,用间接ELISA法检测培养上清中抗体的表达及特异性;用蛋白G亲和层析柱进行抗体的纯化,并对纯化的抗体进行SDS-PAGE、Western blot和竞争性ELISA分析.结果 上清中表达的重组IgG抗体仅与HBsAg呈阳性反应,特异性良好,纯化后其纯度达97.1%.经SDS-PAGE和Western blot分析可见,IgG抗体轻链和重链的相对分子质量分别约为27000和55000,为人源IgG抗体.CHO表达的HBsAg和血源性HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与E.coli表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%.结论 人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体可在杆状病毒载体表达系统中成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁米芳	中国疾病预防控制中心病毒控制所	52	102	5.0	8.0
2	张爱华		38	127	6.0	8.0
3	闭兰		31	88	5.0	6.0
4	詹骞		4	12	2.0	3.0
5	余模松		26	92	5.0	7.0
6	周志军		20	52	4.0	5.0
7	黄仕和		27	108	5.0	9.0
8	彭祥兵		12	21	3.0	4.0