猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用

• 作者: 冼琼珍 叶润全 王淑敏 顾万军 黄良宗
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 胸膜肺炎放线杆菌 PCR 临床应用
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 117-120
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 3198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.02.008

摘要

为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌(APP)的PCR诊断方法,对用以扩增apxⅣA毒力基因3'端长约442 bp的核苷酸片段的引物、模板、Taq DNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选,并进行了特异性及重复性试验;以筛选出的优化条件,对临床可疑病料进行了PCR检测.结果,在25μL体系中,以5 pmol/μL引物、0.25μL Taq DNA聚合酶、2 mmol/L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好,重复性和稳定性高;而对类症菌株的扩增结果则为阴性,表明其特异性强.对分离到APP的病料PCR阳性率为100%(5/5);未分离到APP的纤维渗出性病料中,新鲜与陈旧病料PCR阳性率分别为70.59%(12/17)、50.00%(4/8),而非纤维渗出性病料的PCR结果均为阴性(0/45、0/9).结果表明,建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感,优于细菌学方法,它可作为APP可疑病料的理想诊断方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾万军	佛山科学技术学院生命科学学院	80	641	15.0	22.0
2	黄良宗	佛山科学技术学院生命科学学院	45	251	8.0	14.0
3	冼琼珍	佛山科学技术学院生命科学学院	38	314	11.0	16.0
4	王淑敏	佛山科学技术学院生命科学学院	20	181	8.0	13.0
5	叶润全	佛山科学技术学院生命科学学院	9	24	3.0	4.0