人黑色素瘤抗原MAGE-3肿瘤疫苗的构建及其诱导HLA-A*0201转基因小鼠CTL活性的观察

• 作者: 刘福英 刘贵然 宋淑霞 王俊霞 郑龙
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤抗原MAGE-3 真核/原核表达 HLA-A*0201转基因小鼠 CTL活性
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 739-742
• 页数: 4页
• 分类号: R739.5
• 字数: 3472字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2007.10.001

摘要

目的 通过基因工程的方法获得人黑色素瘤抗原MAGE-3的DNA和蛋白疫苗,并观察其对HLA-A*0201转基因小鼠的CTL活性的影响.方法 用RT-PCR的方法,从人黑色素瘤细胞株A375中扩增MAGE-3的cDNA片段,分别将其插入到pcDNA3.1/V5-His真核和pET32a原核表达载体.将pcDNA-MAGE-3转染B16肿瘤细胞观察其是否能在真核细胞中表达;将pET32a-MAGE-3转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,SDS-PAGE观察融合蛋白表达情况.并用镍柱亲和层析的方法纯化融合蛋白.然后,采用DNA疫苗初次免疫和蛋白疫苗加强的策略免疫HLA-A*0201转基因小鼠,LDH方法检测CTL活性.结果 酶切结果证实,成功地构建了pcDNA-MAGE-3真核表达载体和pET32a-MAGE-3原核表达载体,并在真核细胞B16和原核细胞大肠杆菌中获稳定表达,原核表达产物为融合蛋白且分布于包涵体.用DNA疫苗进行初次免疫,镍柱纯化的融合蛋白加强免疫后,可成功地诱导HLA-A*0201转基因小鼠CTL活性.结论 成功地获得了MAGE-3肿瘤抗原,为进一步完善MAGE-3肿瘤疫苗打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋淑霞	河北医科大学实验动物学部	35	367	10.0	18.0
2	王俊霞	河北医科大学实验动物学部	71	322	11.0	15.0
3	刘福英	河北医科大学实验动物学部	62	303	10.0	13.0
4	郑龙	河北医科大学实验动物学部	21	78	5.0	7.0
5	刘贵然	河北医科大学数学教研室	1	0	0.0	0.0