茶氨酸生物合成工程菌构建

• 作者: 周健 成浩 林智 王丽鸳 王贤波
• 来源期刊: 茶叶科学
• 学科: 农学
• 关键词: γ-谷氨酰转肽酶 茶氨酸 工程菌 构建
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 61-66
• 页数: 6页
• 分类号: S571.1|Q523
• 字数: 4529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-369X.2007.01.009

摘要

通过PCR扩增E.coli DH5α的γ-ggt基因,产物经纯化后用Kpn I和Xho I双酶切,回收γ-谷氨酰转肽酶基因目的片断,并与经相同双酶切的表达载体pET-32a连接,得到重组质粒pET-GGT.将重组质粒转化到E.coli BL21中,获得工程菌.工程菌株经0.05 mol/L IPTG,32℃诱导表达,湿菌体的酶活达到2.0 U/g,大约是出发菌株E.coli DH5α的15倍.工程菌催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到29.40 g/L,L-Gln的转化率为48.22%,其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力比出发菌株E.coli DH5α提高了100多倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成浩	农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所	11	269	9.0	11.0
2	王丽鸳	农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所	10	247	9.0	10.0
3	周健	农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所	10	247	9.0	10.0
4	王贤波	农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所	1	27	1.0	1.0
5	林智	农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所	18	690	13.0	18.0