嗜人按蚊rDNA-ITS2基因的克隆鉴定及SNP分析

• 作者: 庾蕾 张仁利 耿艺介 高世同 黄继莲 黄达娜
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜人按蚊 rDNA第2内转录间隔区 聚合酶链反应 单核苷酸多态性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 分类号: R384
• 字数: 2648字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2007.01.011

摘要

目的 克隆和分析嗜人按蚊核糖体DNA(rDNA)第2内转录间隔区(ITS2)序列,研究嗜人按蚊rDNA-ITS2序列的种属特异性及不同个体rDNA-ITS2序列的单核苷酸多态性(Single Nuclear Polymorphism,SNP).方法 用DNA提取试剂盒从嗜人按蚊中提取DNA摸板,利用蚊虫5.8S和28S序列的保守性设计特异引物进行聚合酶链反应以扩增嗜人按蚊rDNA-ITS2基因,扩增产物经回收纯化后连接到TA载体,经amp+LB固体平板筛选的阳性克隆,经amp+LB液体培养基培养后进行PCR鉴定、EcoRI酶切鉴定和序列分析.结果 经PCR反应扩增出全长556 bp的嗜人按蚊rDNA-ITS2基因,纯化后重组克隆经PCR鉴定可重现556 bp的特异性条带,其酶切产物亦与目的基因PCR产物位置相同.嗜人按蚊6个克隆的同一性为99.6%,其rDNA-ITS2基因单核苷酸存在颠换和插入,在556的范围内有一个A→T,一个G→T的颠换;一个T的插入.结论 嗜人按蚊rDNA-ITS2序列在种间高度保守,但不同个体间也存在一定的SNP多态性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利	深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室	192	798	13.0	17.0
2	耿艺介	深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室	105	506	11.0	15.0
3	高世同	深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室	137	593	11.0	15.0
4	黄达娜	深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室	134	499	10.0	13.0
5	庾蕾	深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室	26	161	9.0	11.0
6	黄继莲	深圳市疾病预防控制中心分子生物研究室	2	12	2.0	2.0