单核细胞增多性李氏杆菌野毒株InlB的分子特征及其表达和纯化研究

• 作者: 乔军 孟庆玲 才学鹏 景志忠 贾桂珍
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 单核细胞增多性李氏杆菌 InlB 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1098-1101
• 页数: 4页
• 分类号: Q932
• 字数: 3848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.06.031

摘要

采用PCR技术扩增单核细胞增多性李氏杆菌TA野毒株内化素B(InlB)基因,进行编码分子的序列和结构分析,并克隆入大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达.该基因全长1893bp,编码630个氨基酸,其中前35个氨基酸残基构成信号肽序列.在推导的InlB蛋白氨基酸序列中,从N端到C端分别包括1个α-螺旋的Cap结构域、6个富含亮氨酸的重复基序(LRR)、1个免疫球蛋白样结构域(IR)、1段B重复序列和3个串联的GW结构域,同时还存在5个潜在的N-联糖基化位点,Leu占所有氨基酸残基的10.2%.与GenBank已经报道的18个不同流行株InlB基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性分别在 91.1%～99.6% 和92.3%～99.8%之间.重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE和Western blot分析证实该基因已经正确表达.用Ni2+亲和层析柱纯化了InlB重组蛋白.