Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜赖氨酰氧化酶活性

• 作者: 史嘉玮 洪昊 董念国
• 来源期刊: 中国胸心血管外科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Amplexred荧光法 组织工程心脏瓣膜 赖氨酰氧化酶 胶原交联
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 3310字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4848.2007.01.008

摘要

目的 采用Amplex red荧光法检测组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valve,TEHV)中赖氨酰氧化酶(lysyloxidase,LOX)的活性.方法 经胰蛋白酶+乙二胺四乙酸、聚乙二醇辛基苯基醚和核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建TEHV.用高糖培养基在体外培养瓣膜27 d,再用不含酚酞和血清的培养基培养24h,收集此时的培养基作为样本,用Amplex red荧光法检测样本中LOX的浓度,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TEHV中LOXmRNA的表达.结果 样本中LOX的荧光值为45.60±1.66,根据标准曲线获得相应的LOX浓度为0.123±0.003 μg/ml,同时各个TEHV均有LOXmRNA的表达,与Amplex red荧光法检测的结果相一致.结论 应用Amplex red荧光法检测TEHV中LOX的活性具有可行性,并为反映LOX对TEHV细胞外基质中胶原交联的重要作用提供了方法依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董念国	华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科	221	659	11.0	13.0
2	史嘉玮	华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科	92	313	10.0	12.0
3	洪昊	华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科	13	24	3.0	4.0