白地霉ch-3低温脂肪酶基因的克隆与表达

• 作者: 付建红 姚斌 杨浩萌 石玉瑚 黄火清
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 物理学
• 关键词: 白地霉ch-3 低温脂肪酶 基因克隆 巴斯德毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 25-29
• 页数: 5页
• 分类号: Q55|O785
• 字数: 6870字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.05.009

摘要

目的:脂肪酶是世界主要工业用酶制剂之一,用基因工程方法克隆与表达白地霉(Geotrichum candidum)ch-3菌株的低温脂肪酶基因.方法:用PCR方法从白地霉ch-3的总DNA中扩增得到一种低温脂肪酶基因lip,将PCR产物连接到pBluescript Ⅱ SK(+)载体上,测序证明正确后再将基因lip插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9α中,含有目的基因的重组质粒在毕赤酵母中进行诱导表达.结果:毕赤酵母成功表达了lip基因,其活性为37U/mL.SDS-PAGE分析显示表达的脂肪酶蛋白相对分子质量约62kDa,比推测分子量大,lip的表达产物可能被糖基化修饰.初步研究表明:重组脂肪酶最适温度为35℃,在0℃仍可保持66%的相对酶活性,对热敏感.结论:实现了低温脂肪酶在毕赤酵母的成功表达,为进一步研究低温酶催化机制和工业化应用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	杨浩萌	中国农业科学院饲料研究所	9	173	6.0	9.0
3	石玉瑚	新疆农业科学院微生物应用研究所	10	71	5.0	8.0
4	黄火清	中国农业科学院饲料研究所	16	100	6.0	9.0
5	付建红	新疆农业科学院微生物应用研究所	5	54	5.0	5.0