VEGF-C基因3'端未翻译区对荧光素酶表达的影响

• 作者: 关华军 王俊 章必成 郭燕 陈正堂
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子C 3'未翻译区 荧光素酶 淋巴管生成
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 922-925
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3994字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.09.010

摘要

目的 构建小鼠血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因3'端未翻译区(3'UTR)的荧光素酶表达载体,利用双荧光报告系统观察VEGF-C基因3'UTR对荧光素酶基因表达的影响.方法 通过PCR分别扩增小鼠Lewis肺癌细胞VEGF-C cDNA全长3'UTR(429bp)和一段312bp的编码区序列(CR),采用基因工程方法 将PCR产物克隆至pTA2克隆载体,随后再亚克隆至荧光素酶报告基因载体(pGL3-Promoter)荧光素酶编码基因下游的Xba Ⅰ酶切位点,使用LipofectamineTM 2000真核转染小鼠Lewis肺癌细胞,化学发光法检测荧光素酶的活性,定量RT-PCR检测荧光素酶mRNA水平.结果 PCR成功扩增出与预期长度相符的小鼠VEGF-C CR (312bp)和VEGF-C 3'UTR (429bp).经酶切、测序鉴定,小鼠VEGF-C基因3'UTR和CR均插入到pGL3-Promoter的Xba Ⅰ位点,插入序列碱基组成和插入方向均正确,获得载体pGL3-VEGF-C 3'UTR和pGL3-VEGF-C CR.荧光素酶报告系统和定量RT-PCR检测显示,与pGL3-Promoter组比较,pGL3-VEGF-C 3'UTR转染组荧光素酶活性和mRNA水平均显著降低,而pGL3-VEGF-C CR组与pGL3-Promoter组之间无显著性差异.结论 VEGF-C基因3'UTR可以抑制荧光素酶的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈正堂	第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所	267	2232	19.0	35.0
2	章必成	广州军区武汉总医院肿瘤科	151	326	9.0	12.0
3	王俊	第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所	26	128	6.0	9.0
4	郭燕	第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所	15	77	4.0	8.0
5	关华军	第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所	9	41	4.0	6.0