猪流行性腹泻病毒CH/JL毒株S基因的克隆、序列分析及线性抗原表位区的鉴定

• 作者: 佟有恩 冯力 刘胜旺 孙东波 时洪艳 陈建飞 陈洪岩
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 S基因 序列分析 线性抗原表位区
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 224-229
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2007.03.011

摘要

以猪流行性腹泻病毒CH/JL毒株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得的3个相互重叠的cDNA克隆覆盖了S基因,序列比对结果表明:PEDV CH/JL株S基因与CV777、Brl/87、JS、KPEDV和Chinju99毒株S基因核苷酸序列的同源性分别为96.97%、96.87%、96.41%、94.02%和93.93%,氨基酸序列的同源性分别为96.17%、95.88%、96.10%、92.36%和92.05%;分子进化树分析结果显示,PEDV CH/JL株S基因与JS毒株S基因亲缘关系最近,处于同一群.利用DNAstar Protean程序预测了PEDV CH/JL株S蛋白一个抗原表位区(83～276aa),将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1后转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,在终浓度1.0mmol/L的IPTG诱导下获得了表达,Western blot结果显示,预测的抗原表位区GST融合蛋白能与猪流行性腹泻病毒多克隆抗血清反应,提示该抗原表位区含有线性抗原表位.