转EGFP基因山羊克隆胚的发育

• 作者: 刘凤军 安志兴 张涌 权富生 李向臣 赵晓娥 郑月茂
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绿色荧光蛋白基因 转基因山羊乳腺上皮细胞 转基因克隆胚
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 458-463
• 页数: 6页
• 分类号: S827.3
• 字数: 5104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.05.008

摘要

利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒,并将之导入山羊乳腺上皮细胞,经G418筛选获得阳性细胞,以阳性细胞作为核供体,利用核移植技术构建转基因克隆胚.结果表明:用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体,电融合法更适合构建转基因克隆胚.转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液,在培养72 h后加入10%的正常山羊血清(Normal goat serum,NGS).荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达,大部分克隆胚发育到8～16细胞以后的时期,绿色荧光蛋白才开始逐渐表达,随着发育时间的延长,绿色荧光蛋白的表达也逐渐增强.说明外源基因在胚胎早期发育阶段可以表达,EGFP可以作为报告基因来实现对外源基因整合及表达的监测.