利用不同实时定量PCR方法分析相对基因表达差异

• 作者: 余舜武 刘鸿艳 罗利军
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 相对定量 标准曲线 实时荧光定量PCR OsRDB1
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1214-1218
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0496-3490.2007.07.027

摘要

利用实时荧光定量PCR方法分析目标基因转录本之间的表达差异,目前常用的分析实验数据的有绝对定量和相对定量方法.为了克服绝对定量方法的繁琐和简化相对定量的分析方法,分别利用2-ΔΔCt、2-ΔCt和标准曲线法对水稻OsRDB1基因在不同化学试剂和激素处理下的表达差异进行了分析,发现2-ΔΔCt必须引入标准的看家基因作为参考,计算方法繁琐,计算结果受扩增效率影响;而利用2-ΔCt和标准曲线法计算方便,节省定量PCR试剂,但其结果易受到RNA浓度测量准确率的影响,其中标准曲线法引入斜率消除扩增效率的影响,最能测得实际的原始拷贝数差异.