猪传染性胃肠炎病毒S蛋白在乳酸菌中的表达

• 作者: 唐丽杰 徐义刚 李一经 欧笛 王荣军 钟涛
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: TGEV S蛋白 乳酸菌 表达及分析
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: Q933
• 字数: 2934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.06.002

摘要

目的:构建猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的细胞内表达重组乳酸乳球菌,确定其最佳表达条件,为重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪传染性胃肠炎奠定基础.方法:根据猪传染性胃肠炎病毒纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR,获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的约2000bp目的片段,将其与表达载体质粒pNZ8048进行连接,通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内,在乳链菌肽(Nisin)的诱导下进行表达,确定最佳表达条件;并通过SDS-PAGE进行检测和Western-blot分析表达蛋白活性.结果:成功获得了TGEV S蛋白在乳酸乳球菌细胞内的表达并且表达的蛋白具有TGE全病毒的抗原性.确定了乳酸乳球菌表达TGEV S蛋白的最佳表达条件为在以1ng/ml的乳链杆菌肽nisin诱导下,诱导后3h,重组蛋白表达效率达最高,重组蛋白约占菌体总蛋白含量的8.7%.结论:在乳酸乳球菌细胞内表达的重组TGEV S蛋白获得了理想表达,为进一步研制开发防治TGE口服疫苗提供物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一经		219	1679	20.0	27.0
2	唐丽杰		90	615	13.0	20.0
3	钟涛		4	27	3.0	4.0
4	徐义刚		33	245	10.0	14.0
5	欧笛		6	60	4.0	6.0
6	王荣军		3	28	2.0	3.0