可剪切多拷贝抗菌肽融合表达载体的构建

• 作者: 刘仁虎 汪小福 陈笑芸 陈锦清 高智谋
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗菌肽 Thanatin 串联重复 融合表达 载体构建
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 758-764
• 页数: 7页
• 分类号: Q5
• 字数: 5195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2007.06.017

摘要

抗菌肽是生物体防御系统产生的一类对外源病菌具有高效杀灭活性的小分子多肽,在植物抗病基因工程中具有重要的应用价值.Thanatin是刺肩蝽(Podisus maculiventris)成虫经诱导产生的一种抗菌肽,由21个氨基酸残基组成,该抗菌肽对革兰阳性、革兰阴性菌以及真菌都有很强的抗菌活性.为研究该抗菌肽转入油菜对菌核病抗性提高的效果,采用同尾酶反复酶切连接的方法构建了分别含1～5拷贝的Thanatin串联融合表达载体,并导入农杆菌用于油菜的遗传转化.研究采用引物重叠法扩增并克隆了抗菌肽基因,并采用了一种在植物体内可被特异性切割的短肽作为连接肽,使多拷贝融合表达的抗菌肽在植物体内可自动剪切为有功能活性的单个抗菌肽单元,以增加抗菌肽表达丰度和抗菌肽的稳定性.研究还采用了大豆几丁质酶的信号肽作为引导肽引导多拷贝融合表达的抗菌肽分泌到细胞间隙,以增强抗菌肽作用效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高智谋	安徽农业大学生命科学院	117	1437	21.0	30.0
2	汪小福	浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所	4	36	3.0	4.0
4	陈笑芸	浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所	34	427	13.0	19.0
5	陈锦清	浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所	40	720	13.0	26.0
8	刘仁虎	浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所	7	83	4.0	7.0