沙门菌PCR快速检测试剂盒的研制与应用

• 作者: 孔繁德 彭海滨 徐淑菲 陆承平 陈琼
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 沙门菌 聚合酶链式反应 检测
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 103-107
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 5406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.02.005

摘要

为建立一种简单、快速、灵敏、准确的沙门菌检测方法,根据沙门菌fimY保守基因序列设计合成了1对引物,建立了快速检测沙门菌的PCR方法,并对反应条件进行优化,组装成快速检测试剂盒.结果显示,所有沙门菌均扩增出526 bp的特异性条带,而非沙门菌均未扩增出任何条带.检测灵敏度达93 CFU,还可检出含3 CFU的样品用BP预增菌的菌液或用MM增菌后的菌液,而且稳定性良好,冷冻至少能保存12个月.采用直接菌体加入法、热裂解法、反复冻融法、CTAB碱裂解法和柱式试剂盒提取法分别提取核酸模板,结果CTAB法效果最好,但操作烦琐,而直接菌体加入法和热裂解法可以达到和柱式试剂盒提取法相同的效果,且操作简便、快速、经济、效果好.通过对临床样品的检测,证实该试剂盒具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点,值得推广应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐淑菲		60	557	13.0	20.0
2	孔繁德	南京农业大学动物医学院	99	925	16.0	26.0
4	陆承平	南京农业大学动物医学院	387	5495	37.0	51.0
5	陈琼		33	310	9.0	16.0
6	彭海滨	福建农林大学动物科学学院	10	201	7.0	10.0