产酶溶杆菌OH11菌株α-水解蛋白酶基因的克隆与表达

• 作者: 刘凤权 朱慧 王云霞 胡白石
• 来源期刊: 中国生物防治
• 学科: 生物学
• 关键词: 产酶溶杆菌OH11菌株 α-水解蛋白酶基因 克隆与表达
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 358-362
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.1|Q78
• 字数: 2588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-9261.2007.04.012

摘要

α-水解蛋白酶是产酶溶杆菌OH11菌株分泌的一种胞外丝氨酸蛋白酶.利用PCR方法从OH11菌株中克隆到该基因.同源性比较其推测产物与产酶溶杆菌ATCC29478菌株和ATCC29487菌株的α-水解蛋白酶有90%以上的序列一致性.基因经Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET30a(+)上构建重组质粒pαLP,并转化宿主菌BL21(DE3)获得BLαLP表达菌株.经IPTG诱导后发现BLαLP菌株产生一相对分子量约为44kD的蛋白.研究表明,该蛋白能将蛋白质水解,在脱脂奶粉培养基上形成水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用.