小鼠骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

• 作者: 刘翠萍 刘超 徐宽枫 武晓泓 茅晓东 蒋晶晶
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓 间充质干细胞 内皮祖细胞 细胞培养
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 694-697,插2
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2007.07.011

摘要

目的:建立一种高效,稳定的从小鼠骨髓中同时分离培养间充质干细胞(MSC)和内皮祖细胞(EPC)的方法.方法:从小鼠骨髓分离单个核细胞,经差速贴壁结合专用血清或特殊培养基分别扩增MSC和EPC.以成骨、成脂诱导分化鉴定MSC,并以流式细胞术(FCM)检测MSC纯度;以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1荧光双标,结合vWF、CD31免疫组化染色鉴定EPC,并计算其纯度.结果:早期贴壁细胞48 h换液时即可见明显集落形成,1周后即达80%融合,传至第3代后经诱导能够向成骨细胞和脂肪细胞分化,FCM检测CD29、CD34、CD45、CD90阳性率分别为(93.86±1.12)%,(0.48±0.38)%,(1.89±1.49)%,(94.11±3.32)%;2次贴壁细胞经EGM-2 MV专用培养基培养后,第3天开始伸展,第5天可见集落形成,约2周左右可融合近80%,传代后Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色阳性率(75.2±4.5)%,vWF、CD31免疫组化染色阳性率分别为(55.7±4.7)%和(52.5±3.6)%.结论:采用该方法可以同时培养扩增骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞,效率高,稳定性和重复性好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐宽枫	南京医科大学第一附属医院内分泌科	41	221	9.0	13.0
2	刘超	南京医科大学第一附属医院内分泌科	426	3806	27.0	40.0
3	刘翠萍	南京医科大学第一附属医院内分泌科	119	928	15.0	23.0
4	武晓泓	南京医科大学第一附属医院内分泌科	111	853	15.0	22.0
5	茅晓东	南京医科大学第一附属医院内分泌科	29	180	8.0	12.0
6	蒋晶晶	南京医科大学第一附属医院内分泌科	7	20	2.0	4.0