18O稳定同位素标记定量蛋白质组研究技术的建立与优化

• 作者: 何建勇 刘新 卢庄 应万涛 蔡耘 钱小红 钱林艺
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 稳定同位素标记 18O 定量蛋白质组学 质谱 液相色谱
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 分类号: O6
• 字数: 2994字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2007.02.001

摘要

建立了18O稳定同位素标记方法,用于复杂体系蛋白质相对定量分析.对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化.结果表明,采用酶切后标记的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH 5.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲体系中,37℃18O标记反应16 h,绝大部分肽段即可达到100%的标记效率.对多个16 O/18O 成对肽段峰强度的动态范围及定量准确度进行了考察.结果表明,18O标记方法是一种简便、稳定、可靠的相对定量方法,10倍动态范围内,标记率相对标准偏差在18.4%以内,16 O/18O峰强度呈很好的线性关系.本实验考察了标记后的肽段在不同溶液体系中的稳定性,为复杂样品的预处理和预分离的溶液条件提供了依据.