胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过G→A突变抑制乙型肝炎病毒的复制

• 作者: 于晓方 何智文 应松成 张伟 张旭照 徐荣臻 方永明
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: APOBEC3G 胞嘧啶脱氨酶 乙型肝炎病毒 突变
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 135-139
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 3950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-5101.2007.02.012

摘要

目的 研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制.方法 利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率.共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(core)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内core相关HBV DNA X基因进行PCR扩增、T-A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变.结果 经EGFP判定的转染效率平均为29%.共转染0.5 μg A3G和0.5 μg HBV的HepG2细胞内core相关HBV DNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μg A3G和0.5 μg HBV的平均下降为对照的0.6%.共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16～37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变.进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上.结论 胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导HBV DNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	93	456	11.0	17.0
2	徐荣臻	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	26	192	9.0	13.0
3	方永明	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	14	98	6.0	9.0
4	何智文	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	4	24	3.0	4.0
5	张旭照	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	4	27	3.0	4.0
6	应松成	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	1	3	1.0	1.0
7	于晓方	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	2	4	1.0	2.0