锯缘青蟹卵巢均一化cDNA文库的构建

• 作者: 张子平 林鹏 王淑红 王艺磊 贾锡伟 邹志华 陈锦民
• 来源期刊: 福建水产
• 学科: 农学
• 关键词: 性腺发育 均一化cDNA文库 锯缘青蟹
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S9
• 字数: 2311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5601.2007.04.001

摘要

为探讨锯缘青蟹(Scylla serrata)性腺发育的分子机制,本研究提取锯缘青蟹卵巢的总RNA,经oligotex试剂分离mRNA,利用SMART(Switch mechanisms at the 5'end of RNA transcript)技术及双链特异核酸内切酶DSN(duplex-specific nuclease)的特性构建均一化cDNA文库.经检测文库约含有4.7×107重组子,扩增后的文库含有1011以上重组子.从文库中随机挑取24个克隆进行PCR检测,文库的插入cDNA长度为500bp-2.5kb,重组率为95.8%.该文库的成功构建,为采用基因芯片技术开展锯缘青蟹性腺发育相关功能基因的研究奠定了基础.