几种海洋微藻基因组DNA的分离提取及PCR检测

• 作者: 张桂和 徐碧玉 王珺
• 来源期刊: 热带海洋学报
• 关键词: 海洋微藻 DNA提取 CTAB 酶切 PCR检测
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 海洋生物学
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5470.2007.01.012

摘要

用改良CTAB法分别提取6种海洋微藻的基因组DNA,发现提取的DNA纯度、产率高(＞100μg·g-1鲜重),DNA完整性好.以6种海洋微藻的基因组DNA为模板,并以5'TTCGAGCCAG3'(OPC-01)为随机引物,对栽PCR反应条件进行研究.结果表明,25μl反应体系中,Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP 5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:2.0mmol·L-1、1.6U、20pmol·L-1、50ng和2.5mmol·L-1.扩增程序优化为:94℃预变性5min,94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,循环45次,最后于72℃再延伸10min.酶切实验结果表明,6种海洋微藻的基因组DNA都能被EcoRⅠ酶切,酶切图谱呈弥散状,满足分子水平操作的要求,可直接应用于进一步的分子生物学实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐碧玉	中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室	96	1042	20.0	28.0
2	王珺	海南大学海洋学院	30	238	9.0	15.0
3	张桂和	海南大学海洋学院	19	249	8.0	15.0