DNA-PKcs、Ku80及ATM备选宫颈癌放疗增敏靶点的体外研究

• 作者: 于世英 庄亮 曹阳 熊慧华 黄晓园
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈肿瘤 HeLa细胞 DNA-PKcs RNA干扰 LY294002 放射敏感性
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 724-729
• 页数: 6页
• 分类号: R737.33
• 字数: 4719字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2007.07.011

摘要

背景与目的:DNA双链断裂(DNA double strand break,DSB)是细胞受辐射后最致命的损伤,而DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-dependent protein kinase catalytic subunit,DNA-PKcs)、Ku80和ATM(ataxia-telangiectasia mutated)为DSB的主要修复蛋白.宫颈癌是以放疗为主要治疗手段的肿瘤.但其肿瘤细胞对放射线的敏感性不同.本实验拟研究3种DSB修复蛋白的表达与宫颈癌细胞放射敏感性的关系.并探讨DSB修复蛋白成为宫颈癌放疗增敏靶点的可能性.方法:免疫组化法检测41例宫颈癌患者组织中DNA-PKcs、Ku80和ATM蛋白的表达情况;Western blot检测8株肿瘤细胞(包括4株宫颈癌细胞)中3种蛋白的表达,克隆形成实验检测SF2 (suivival fraction at 2 Gv)、α值,分析蛋白表达水平和SF2、α值的关系;利用靶向抑制DNA-PKcs的shRNA表达质粒和小分子抑制剂LY294002,分别抑制HeLa细胞DNA-PKcs蛋白表达和活性后,克隆形成实验和流式细胞仪检测HeLa细胞受6 MVX线照射后的SF2、α值和凋亡率变化.结果:在41例宫颈癌组织中,Ku80、DNA-PKcs和ATM的阳性率分别为70.73%、68.29%和19.51%:8株肿瘤细胞中Ku80、DNA.PKcs和ATM蛋白的相对表达量与各细胞SF2、α值各不相同,作Pearson线性相关分析后得出DNA-PKcs的表达水平与SF2之间有明显的正相关关系(r=0.72,P=0.04);靶向抑制DNA-PKcs的shRNA可以促进HeLa细胞的放射敏感性,其SF2值为0.37,显著低于对照HeLa细胞的0.53(P＜0.05);单独接受50 μmol/L LY294002作用1 h HeIa细胞的凋亡率未见明显增加,但先经LY294002处理再照射6 Gy的HeLa细胞在48 h和72 h的凋亡率比单独照射6 Gy的HeLa细胞凋亡率显著增加(48 h点:t=3.25,P=0.03;72h点:t=3.01,P=0.04).结论:DNA-PKcs在宫颈癌组织中表达较高,且其表达水平可以预示肿瘤细胞的放射敏感性:抑制DNA-PKcs的表达或活性可以促进HeLa细胞的放射敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于世英	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	259	1644	21.0	31.0
2	熊慧华	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	44	290	8.0	15.0
3	庄亮	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	37	253	8.0	14.0
4	黄晓园	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	16	133	6.0	11.0
5	曹阳	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	74	273	9.0	14.0