以转染白血病抑制因子基因的人胚肺成纤维细胞为饲养层培养人胚胎生殖细胞

• 作者: 刘永刚 李芳菲 王亚平 王建伟 王莎莉
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人胚肺成纤维细胞 白血病抑制因子 饲养层 逆转录聚合酶链反应 免疫印迹法 人胚胎生殖细胞
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 310-314
• 页数: 5页
• 分类号: R321.1
• 字数: 3555字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2007.03.012

摘要

目的 以转染白血病抑制因子(LIF)基因的人胚肺成纤维细胞为饲养层培养人胚胎生殖细胞,为建立无动物成分污染的人胚胎生殖细胞培养体系奠定基础.方法 将LIF真核表达载体pcDNA3.1(+)-LIF转染到人胚肺成纤维细胞中,通过筛选和鉴定获得表达LIF的阳性细胞.将原始生殖细胞(PGCs)种植到转染后细胞制备而成的饲养层上,在不添加外源性LIF的条件下培养,并对PGCs来源的细胞集落进行鉴定.结果 经RT-PCR及Western blotting 鉴定证实,转染pcDNA3.1(+)-LIF的人胚肺成纤维细胞表达LIF基因.在转染后人胚肺成纤维细胞上生长的PGCs可形成典型的鸟巢状集落,经检测集落碱性磷酸酶活性呈强阳性,表达胚胎阶段特异性抗原SSEA-1、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81,及未分化标志Oct-4.结论 用转染LIF基因后的人胚肺成纤维细胞作为饲养层能支持PGCs来源人胚胎生殖细胞的生长,维持自我更新.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王莎莉	重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室	69	678	14.0	23.0
2	王亚平	重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室	161	1806	23.0	36.0
3	刘永刚	重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室	14	115	7.0	10.0
4	王建伟	重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室	35	183	7.0	12.0
5	李芳菲	重庆医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室	16	79	6.0	8.0