胚胎发育期和冷冻保护剂剂量对Nakagata小鼠胚胎冷冻效果的影响

• 作者: 刘牧 孙井江 孟金萍 张建军 张文明 薛孝先 高珊 黄馨
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 胚胎 冷冻 冷冻保护剂
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 666-669,S2
• 页数: 5页
• 分类号: R321
• 字数: 4338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2007.11.013

摘要

目的 利用不同剂量的冷冻保护剂,对ICR和Km小鼠不同发育期的胚胎进行冷冻和解冻实验.探讨N akagata小鼠胚胎玻璃化冷冻管方法,使用不同剂量的冷冻保护剂等因素对冷冻效果的影响 . 方法 2细胞期胚胎在KSOM微滴培养液内分别培养到2细胞、4细胞和8细胞期胚胎,分别加入50 μL,100 μL,200 μL的DAP213冷冻保护剂,利用Nakagata方法冷冻,解冻以及观测解冻后培养至囊胚期胚胎的冷冻效果.结果 冷冻保护剂DAP213剂量和ICR,KM小鼠胚胎不同细胞发育期对冷冻效果具有显著的交互影响(P＜ 0.01).相对而言,冷冻保护剂剂量对结果的影响(P＞0.05)低于胚胎细胞发育期对冷冻效果的影响(P＜0.01).结论 冷冻保护剂的剂量和胚胎细胞发育期均会影响冷冻实验的结果.胚胎的细胞发育期对冷冻效果的影响更大.对2细胞期,4 细胞期和8细胞期的胚胎进行冷冻.8细胞期胚胎的冷冻效果最好,4细胞期胚胎冷冻效果最差.利用Nakagata冷冻管方法建立小鼠胚胎冷冻库,100 μL冷冻保护剂效果较好.不同小鼠的品系也可影响冷冻结果.