膜芯片技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体、淋病奈瑟菌和3种支原体的方法学研究

• 作者: 刘小立 向华国 涂植光 熊礼宽 苏放明
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 核酸杂交 沙眼衣原体 淋病奈瑟菌 支原体 寡核苷酸探针
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 758-761
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 3544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-5101.2007.08.020

摘要

目的 建立和评价一个新的多重PCR-反向线点杂交技术(RLB)快速同时检测泌尿生殖道沙眼衣原体(Ct)、淋病奈瑟菌(Ng)和3种支原体感染的方法.方法 分别选择Ct隐蔽质粒和Ng 16S rRNA基因设计两对特异性引物,以支原体内转录间隔序列(ITS)设计一对支原体属通用引物,生物素标记下游引物.构建三重PCR同时扩增Ct、Ng、解脲脲原体(Uu)、微小脲原体(Up)、人型支原体(Mh)等菌DNA,然后与固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷酸探针杂交.并对142份经荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Ct和Ng的性病高危人群标本,以及45份经支原体液体培养法鉴定的标本进行检测.结果 多重PCR可同时扩增Ct、Ng、Uu、Up和Mh标准菌株DNA,其PCR产物的片段长度为208～408 bp.97份FQ-PCR Ct阳性标本中有93份经多重PCR-RLB检测为Ct阳性,45份FQ-PCR Ct阴性标本中35份多重PCR-RLB阴性.41份FQ-PCR Ng阳性标本中34份多重PCR-RLB Ng阳性,101份FQ-PCR Ng阴性标本中98份多重PCR-RLB阴性.其中36份经多重PCR-RLB检测为混合感染.32份支原体液体培养阳性标本中28份多重PCR-RLB阳性,13份支原体培养阴性标本经多重PCR-RLB检测均为阴性.结论 多重PCR-RLB可快速同时检测Ct、Ng、Uu、Up和Mh,为性传播疾病的临床诊断提供了一种可靠的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小立		110	769	14.0	18.0
2	涂植光	重庆医科大学医学检验系	172	1533	19.0	32.0
3	苏放明		26	188	8.0	13.0
4	熊礼宽		38	198	9.0	12.0
5	向华国		14	61	5.0	7.0