短发夹RNA靶向抑制环氧化酶-2基因表达对肺癌细胞A549增殖的影响

• 作者: 刘靳波 刘预 杨义明 涂植光 甘晓协 陈亚芹
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 基因表达 短发夹RNA
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 1172-1175
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2556字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1009-9158.2007.10.026

摘要

目的 评价短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)靶向肺癌细胞A549环氧化酶-2(COX-2)基因表达的抑制作用,并观察对肺癌细胞A549生长和细胞周期的影响.方法 将抑制COX-2基因的shRNA DNA模板插入到真核表达载体pGenesil-1的U6启动子下游,构建靶向抑制COX-2基因的重组表达载体pshRNA-COX-2.将试验分为3组:未转染肺癌细胞A549组、阴性对照HK组和pshRNA-COX-2转染组.用脂质体LipofectamineTM2000转染肺癌细胞A549,逆转录(RT)-PCR和免疫印迹法(Wb)分别检测COX-2基因mRNA和蛋白表达情况,流式细胞术检测细胞周期,细胞计数检测细胞生长变化.结果 与阴性对照组相比,pshRNA-COX-2重组表达载体抑制COX-2 mRNA及蛋白表达的抑制率分别为72.2%和48.6%;Go-G1期细胞由63.7%上升为71.0%,S期细胞由26.5%下降为20.0%;细胞生长明显减慢.结论 pshRNA-COX-2重组表达载体能显著抑制肺癌细胞COX-2表达,引起G0-G1期细胞增多,S期细胞减少,从而抑制肺癌细胞生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘预	重庆市肿瘤研究所临床检验中心	36	317	10.0	17.0
2	甘晓协	重庆市肿瘤研究所临床检验中心	9	52	4.0	7.0