用质粒作底物测定核糖体失活蛋白酶活性的新方法

• 作者: 刘望夷 张绍铃 王洪涛
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 核糖体失活蛋白(RIP) 超螺旋质粒DNA 凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 991-995
• 页数: 5页
• 分类号: Q5|Q7|Q81
• 字数: 4070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2007.09.014

摘要

植物核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating protein,RIP)是一类能作用于核糖体最大RNA的独特蛋白质.它是研究蛋白质生物合成中核糖体RNA结构与功能的有力工具.利用RIP能在DNA中脱去一些腺嘌呤碱基使超螺旋DNA解旋的特点,分别以常用的质粒PUC18、PUC19和PBR322 DNA为底物,建立了测定RIP酶活性的一种新方法,其灵敏度是50ng(天花粉蛋白)和5 ng(还原型的辛纳毒蛋白),酶催化反应的时间是60 min.这个新方法具有方便、快捷、灵敏的特点,避免了常用方法中制备核糖体、提取RNA的仪器和技术条件的限制,检测的时间由原来的几天缩短到约120 min,大大地降低了检测的费用,为广泛和深入地研究RIP提供了有利的条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张绍铃	南京农业大学园艺学院	271	4662	36.0	50.0
2	王洪涛	南京农业大学园艺学院	4	38	3.0	4.0
6	刘望夷	中国科学院生物化学与细胞生物学研究所	15	67	4.0	8.0