人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选

• 作者: 刘乃丰 吴国球 张臣 王明虹 范小波 赵桂琴
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 结缔组织生长因子 噬菌体展示 人源单链可变区片段
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 464-468
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 3939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2007.05.019

摘要

目的:从人源单链可变区片段(ScFv)文库中筛选与结缔组织生长因子(CTGF)特异结合的噬菌体克隆,获得ScFv氨基酸序列.方法:以重组硫氧化还原蛋白-结缔组织生长因子(TrxA-CTGF)融合蛋白为靶目标,用差异吸附法,逐步增加选择压力,经过4轮亲和筛选后随机挑取8个克隆,提取DNA后测序;测序阳性的DNA转化E.coli HB2151,IPTG诱导后用间接ELISA方法检测培养上清单链抗体的活性.MTT法测定单链抗体对CTGF促人近曲肾小管上皮HK-2细胞增殖作用的影响.结果:从8个克隆中获得7个完全一致的DNA序列(W0616);另有1个克隆丢失了重链,且轻链框架区(FR)和互补决定区(CDR)序列与W0616不一致;阳性克隆经诱导后,培养上清用间接ELISA试验证实能与CTGF发生特异性结合,与TrxA及阴性对照比较差异显著(P＜0.001).同时,该单链抗体片段能明显抑制CTGF引起的HK-2细胞的增殖.结论:成功获得与CTGF特异结合的人源单链抗体可变区序列,为CTGF抑制剂的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘乃丰	东南大学临床医学院心血管研究所	171	1070	15.0	23.0
2	吴国球	东南大学附属中大医院临床检验中心	46	241	8.0	13.0
3	范小波	中国药科大学生命科学与技术学院	2	7	1.0	2.0
4	张臣	东南大学附属中大医院临床检验中心	5	19	3.0	4.0
5	赵桂琴	东南大学临床医学院心血管研究所	2	10	2.0	2.0
6	王明虹	东南大学临床医学院心血管研究所	4	22	3.0	4.0