一种新的B链C端去四肽胰岛素的研制方法

• 作者: 张元兴 王一成 石嘉豪 费俭
• 来源期刊: 细胞生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单体胰岛素前体 B链C端去四肽胰岛素 胰蛋白酶 羧肽酶B
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 771-776
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7666.2007.05.029

摘要

报道了将单体胰岛素前体(MIP)经胰蛋白酶和羧肽酶B两步连续酶切获得B链C端去四肽胰岛素(DTI)的方法.MIP由甲醇酵母表达,最高发酵表达量达到150 mg/L.发酵液中MIP通过疏水层析,分子筛初步纯化后直接进行酶切,在胰蛋白酶酶切3 h后加入抑制剂p-aminobenzamidine处理15 min,然后直接加入羧肽酶B酶切6 h,再通过反相柱纯化即可得到纯品DTI,从分子筛到最后DTI,总纯化得率达到77%.按中国药典小白鼠惊厥法测定得DTI的生物活力为22 IU/mg,是胰岛素的80%,在Superdex G-75分子筛上测定DTI的解离聚合曲线,证明其是单体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张元兴	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	126	951	16.0	24.0
2	费俭	同济大学生命科学与技术学院	17	71	4.0	8.0
3	石嘉豪	同济大学生命科学与技术学院	5	38	2.0	5.0
4	王一成	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	1	1.0	1.0