斑马鱼胚胎中Cre/lox介导的定点整合

• 作者: 朱作言 汪亚平 秦瑶 胡炜
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 农学
• 关键词: Cre重组酶 斑马鱼 定点整合 盒式交换
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 资源环境与生物技术
• 页码范围: 1072-1076
• 页数: 5页
• 分类号: S9
• 字数: 4705字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2007.10.016

摘要

采用两种类型的lox突变体和双色荧光报告基因,构建了双交换载体pCMVlox66-CreintEGFPlox2272和Plox71RFPlox2272.将Cre酶基因插入载体pCS2+,获得了体外转录模板质粒pCSCre.为检测Cre重组酶对斑马鱼胚胎发育的影响,将体外转录的Cre RNA稀释至不同浓度并分别注射入斑马鱼受精卵.结果显示,当Cre RNA浓度高于200ng/μL时会导致高死亡率和高畸形率;而浓度低于100ng/μL的Cre RNA对胚胎发育不造成影响.进一步将50ng/μL的Cre RNA同双交换载体共注射到斑马鱼受精卵中,筛选到发红色荧光的胚胎.PCR检测和测序鉴定证实,在Cre重组酶作用下,两个载体中lox位点间的荧光基因发生了置换反应.实验结果表明,Cre/lox系统介导的盒式交换反应是实现转基因鱼外源基因定点整合的有效策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡炜	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	46	511	14.0	21.0
2	汪亚平	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	59	896	16.0	28.0
3	朱作言	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	64	813	16.0	25.0
4	秦瑶	中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室	5	31	4.0	5.0