狂犬病毒核蛋白在大肠杆菌中的克隆及高效表达

• 作者: 丁守怡 刘明军 刘海婷 唐青 宋旭霞 王宏 王斌 钱冬萌 闫志勇
• 来源期刊: 世界感染杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病毒 核蛋白 基因表达.
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

目的 构建原核表达系统对狂犬病毒(RV)CVS株的核蛋白(NP)进行表达,并对其进行初步的血清学鉴定.方法 以重组质粒Teasy-RVNP为模板,利用PCR方法扩增狂犬病毒(RV)CVS株核蛋白(NP)的DNA片段,并重组入原核高效表达载体PET-15 b.用酶切电泳验证重组结果的正确性;并通过测序检查质粒重组后序列有无变化.在大肠杆菌BL21中进行表达.结果 SDS-PAGE电泳结果表明,在51KDa处有一条蛋白表达带Western-blot分析证明,51KDa蛋白带可与抗体血清发生特异性反应.结论 成功构建了PET-15b-NP原核表达载体,表达产物为狂犬病毒核蛋白,为生产纯度高且价廉的RVNP抗原奠定了基础.为制备测定RVNP抗体的免疫诊断试剂提供了条件.