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摘要:
非洲爪蟾Paraxial Protocadherin(PAPC)是一个在爪蟾Spemann组织者特异表达的膜蛋白.它在爪蟾原肠运动阶段的汇聚延伸运动和体节发生阶段的体节边界形成,以及早期听泡的形态发生和细胞特化过程中都有重要的作用.为了研究PAPC基因在早期胚胎发育过程中的表达及其生物学功能,需要制备PAPC抗体.应用谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S transferase,GST)表达系统表达GST-PAPC融合蛋白,亲和纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得PAPC多克隆抗体.免疫印迹分析发现,以1∶3000稀释的该多克隆抗体为一抗时,能够在转染了全长PAPC质粒的HEK293T细胞的蛋白质抽提物中,特异地识别出150 ku的印迹条带.同时,GST-PAPC融合蛋白可以竞争性抑制该抗体对全长PAPC质粒转染细胞的蛋白质抽提物的特异性条带.用1∶500稀释的该抗体为一抗进行免疫荧光分析时,发现,PAPC多克隆抗体能够识别在HEK293T细胞中过表达以及爪蟾动物极细胞中过表达的PAPC蛋白,荧光信号定位在细胞膜上.免疫印迹分析证明,PAPC抗体能够识别爪蟾胚胎中内源表达的PAPC蛋白.
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文献信息
篇名 非洲爪蟾PAPC多克隆抗体的制备及其特异性鉴定
来源期刊 生物化学与生物物理进展 学科 生物学
关键词 非洲爪蟾 Paraxial Protocadherin(PAPC) 原核表达 多克隆抗体 免疫印迹 免疫荧光
年,卷(期) 2007,(2) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 222-228
页数 7页 分类号 Q78
字数 737字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-3282.2007.02.016
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研究主题发展历程
节点文献
非洲爪蟾
Paraxial Protocadherin(PAPC)
原核表达
多克隆抗体
免疫印迹
免疫荧光
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
生物化学与生物物理进展
月刊
1000-3282
11-2161/Q
大16开
北京朝阳区大屯路15号中国科学院生物物理研究所内
2-816
1974
chi
出版文献量(篇)
3726
总下载数(次)
14
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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