检测牛分枝杆菌的噬菌体生物扩增法的建立及初步应用

• 作者: 唐明霞 彭广能 杨华 王洁 白永平 石梅 秦莲花 胡忠义 钟志军 马晓平
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 分枝杆菌噬菌体 牛分枝杆菌 检测方法 牛乳
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1224-1229
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61+8|R446.5
• 字数: 5111字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.11.014

摘要

建立噬菌体生物扩增法(PhaB)检测牛分枝杆菌,将建立的方法用于22株牛分枝杆菌临床分离株及20种常见非结核分枝杆菌(NTM)及5种非分枝杆菌,同时对203头疑患牛结核病奶牛的奶样进行检测,其结果与皮内变态试验、涂片法、罗氏培养进行比较.结果表明,噬菌体工作浓度为1×109 PFU/mL、37℃感染2 h为最佳检测条件;杀毒剂浓度为100 mmol/L,室温作用10 min即可完全杀灭受试噬菌体;加热灭活的细菌和指示细菌不被噬菌体感染;牛分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和22株牛分枝杆菌临床分离株检测结果均为阳性,16种NTM和5种非分枝杆菌为阴性,4种NTM(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(＞105 CFU/mL)检测结果为阳性;该法可检测出60～120 CFU/mL牛分枝杆菌;批内、批间变异系数均小于15%,重复性良好;203头检测奶牛中,PhaB法、涂片法、皮内变态试验和罗氏培养结果分别有14头(6.9%)、17头(8.4%)、21头(10.3%)和12头(6.0%)为阳性,PhaB法与其他3种方法比较,阳性准确性、特异性都在96%以上,敏感性在71%～100%.该法检测牛分枝杆菌具有快速、简便、灵敏、特异性高等特点.