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摘要:
目的 应用寡核苷酸芯片技术高通量分析原发性肝癌与癌旁组织以及正常肝组织的基因表达差异,探索与疾病进展相关的靶基因.方法 抽提原发性肝癌患者的癌组织、癌旁组织以及正常肝组织的总RNA,应用芯片实验室(Lab-on-chip)进行RNA质量检测;总RNA纯化后进行逆转录cRNA合成、荧光标记和纯化,将癌组织和正常肝组织、癌组织和癌旁肝组织的cRNA探针分别与Agilent寡核苷酸芯片(21,074探针)进行杂交,洗涤后应用Agilent Scanner获取图像,Feature Extraction软件进行定量分析处理.挑选明显差异表达的基因进行SYBR GreenI染料掺入的荧光realtime RT-PCR验证.结果 (1)癌组织、癌旁肝组织以及正常肝组织的总RNA质量高,反转录cRNA及荧光标记质量好;(2)2倍差异表达基因中,上调基因共420个,下调基因共552个,其中包括上调的基质金属蛋白酶相关基因(MMP)-9、-11和-12;(3)挑选5倍上调基因MMP-12为代表,以β-actin为内对照的real time RT-PCR结果提示,MMP-12在癌、癌旁和正常肝组织中的2-△ct值分别为0.0030、0.0028和0.0020.结论 (1)应用Agilent寡核苷酸芯片高通量、高效率地分析原发性肝癌发生发展过程中的基因表达差异,可以筛选新的治疗靶点;(2)原发性肝癌的发生发展涉及多基因、多步骤,是一个复杂的过程;(3)MMP相关基因表达上调可能涉及原发性肝癌的发生发展过程,确切机制有待深入研究.
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文献信息
篇名 基质金属蛋白酶相关基因表达上调与原发性肝癌的发生发展的关系
来源期刊 实用肿瘤学杂志 学科 医学
关键词 原发性肝癌 寡核苷酸芯片 基质金属蛋白酶
年,卷(期) 2007,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 23-27
页数 5页 分类号 R735.7
字数 4170字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-3070.2007.01.008
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 施瑞华 南京医科大学第一附属医院消化内科 174 1190 17.0 24.0
2 张国新 南京医科大学第一附属医院消化内科 125 705 14.0 19.0
3 刘秀峰 南京中国人民解放军第八一医院全军肿瘤中心内科 1 3 1.0 1.0
4 秦叔逵 南京中国人民解放军第八一医院全军肿瘤中心内科 1 3 1.0 1.0
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研究主题发展历程
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原发性肝癌
寡核苷酸芯片
基质金属蛋白酶
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
实用肿瘤学杂志
双月刊
1002-3070
23-1212/R
大16开
黑龙江省哈尔滨市南岗区保健路6号
14-159
1986
chi
出版文献量(篇)
3796
总下载数(次)
4
总被引数(次)
11941
论文1v1指导