小鼠精原细胞体外增殖与冷冻保存

• 作者: 刘军 刘凤军 张涌 李学家 王勇胜
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小鼠 精原细胞 增殖 冷冻保存
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 633-639
• 页数: 7页
• 分类号: S185
• 字数: 6399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.04.017

摘要

利用一步酶法将7日龄昆白系小鼠睾丸分离获得生精上皮单细胞悬液(主要含精原细胞和支持细胞),分别接种于D-MEM、D-MEM/F12和KSOM后,系统研究其精原细胞的存活和增殖情况,并对生精上皮单细胞、曲细精管及完整睾丸进行了-70 ℃冷冻保存,同时对生精上皮单细胞进行了液氮冷冻(-196 ℃)保存.结果表明,小鼠精原细胞在D-MEM和D-MEM/F12中均能存活并增殖,表现为在培养的第1～9天/1～8天呈逐渐减少趋势,第9～13天/8～12天呈增殖趋势,第17天/16天以后增殖减缓,而在KSOM中只短暂存活不能增殖.生精上皮单细胞、曲细精管及完整睾丸-70 ℃短期(1周和2周)冷冻保存及单细胞悬液液氮短期(2周)和中长期(1和3个月)冷冻保存后,均可获得较理想的细胞存活率(均大于85%).