狂犬病病毒核蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 周继勇 申会刚 蔡月琴 郭军庆 马益萍
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病病毒 核蛋白 高效表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 145-149
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 4305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.02.014

摘要

为获得狂犬病病毒(RV)核蛋白抗原,采用RT-PCR方法从狂犬病病毒ERA株中扩增了RV核蛋白基因,分别亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,经PCR和双酶切鉴定以及序列测定,重组质粒构建成功.将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,表达的核蛋白再经Ni2+-NTA亲和层析纯化.结果显示,核蛋白在pET-32a(+)中的表达量(30.4%)高于在pET-28a(+)中的表达量(19.4%),培养物中的高纯度核蛋白产量分别为13.6和8.45 mg/L.经Western-blotting检测,不同载体表达的核蛋白均可被兔抗RV多克隆抗体特异识别,表明核蛋白具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继勇	浙江大学动物预防医学研究所	86	753	16.0	23.0
2	申会刚	浙江大学动物预防医学研究所	8	90	4.0	8.0
3	郭军庆	浙江大学动物预防医学研究所	11	82	5.0	8.0
4	蔡月琴	浙江大学动物预防医学研究所	3	33	2.0	3.0
5	马益萍	浙江大学动物预防医学研究所	1	16	1.0	1.0