小鼠血管内皮细胞表达人DAF和CD59对其心脏在人血清灌注下做功的影响

• 作者: 刘思金 劳为德 张志宏 张月 李光三 李胜芝 王广有 马腾骧
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转基因 小鼠 抗体,异嗜性 心室功能,左 内皮细胞 补体
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 303-307
• 页数: 5页
• 分类号: R6
• 字数: 4313字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2007.05.013

摘要

目的 探讨联合转人衰变加速因子(DAF)和CD59基因对小鼠心脏在人血清灌注下做功及组织结构的影响. 方法 采用受精卵显微注射技术,将人DAF和CD59基因注入昆明小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健康的受精卯植入假孕母鼠的输卵管中待分娩.提取足月产小鼠(G0代)基因组DNA,以聚合酶链反应(PCR)及Southern印迹杂交确定外源基因整合情况,应用流式细胞术检测人DAF和CD59在转基因小鼠白细胞上的表达,免疫组织化学染色检测人DAF和CD59在转基因小鼠心脏、肝脏及肾脏组织中的表达.取出转基因成功小鼠的心脏,在体外以人血清进行灌注,测定其做功能力,HE染色及免疫组化染色观察灌注后心脏的组织学变化以及补体C3c的沉积情况.以单一转DAF基因的小鼠为对照. 结果 共获得G0代小鼠135只,经PCR及Southern印迹杂交分析,11只(8.1%,11/135)整合有人DAF和CD59外源基因,其中6只的白细胞膜表面人DAF和CD59表达阳性,强度分别为(86±6)%和(85±8)%,单转人DAF基因者(87±7)%,差异无统计学意义.人DAF及CD59仅表达于转基因小鼠心脏、肝脏及肾脏组织中的血管内皮细胞上.在人血清灌注后60 min内,普通小鼠的心脏做功急剧下降,接近40 min时心脏停止搏动;转DAF基因小鼠的心脏做功也下降,但仍维持在最大值的20%以上;转DAF和CD59双基因小鼠的心脏做功维持在最大值的40%以上.在人血清灌注的10～60 min,转基因小鼠心脏做功能力明显强于普通小鼠心脏(P＜0.05);灌注20～60 min时,转双基因小鼠的心脏做功能力明显强于转DAF基因小鼠心脏(P＜0.05).普通小鼠心脏在人血清灌注后组织裂解较多见,肿胀严重,而转基因小鼠心脏组织的病理改变明显轻于普通小鼠,转双基因者的病理变化又明显轻于单一转DAF者,心肌血管中人C3c的沉积也明显少于单一转DAF者. 结论 血管内皮细胞特异性表达人DAF和CD59,可明显阻抑其心脏在异种血清灌注下的做功能力下降及C3c在血管中的沉积,这可能对抵御超急性排斥反应有一定帮助.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马腾骧		65	246	8.0	12.0
2	王广有		35	127	6.0	10.0
3	劳为德	中国科学院遗传与发育生物学研究所	21	203	8.0	14.0
4	李胜芝		17	42	3.0	6.0
5	张志宏		18	67	5.0	7.0
6	刘思金	中国科学院遗传与发育生物学研究所	25	235	9.0	14.0
7	李光三	中国科学院遗传与发育生物学研究所	11	21	3.0	4.0
8	张月		4	8	2.0	2.0