咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性检测

• 作者: 崔玉 杨军 詹林盛
• 来源期刊: 感染、炎症、修复
• 学科: 医学
• 关键词: α-半乳糖苷酶 表达 活性
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 75-78
• 页数: 4页
• 分类号: R9
• 字数: 2782字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8521.2007.02.003

摘要

目的:初步证实咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性.方法:通过PCR扩增得到咖啡豆α-半乳糖苷酶基因克隆到载体pGEM-T easy,目的片段与预期的大小一致.咖啡豆α-半乳糖苷酶基因与分泌性原核表达载体pAS18连接,转化到宿主菌E.coli JM83.经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳分析,Western-blot印迹证实蛋白表达的特异性.结果:PCR扩增得到目的片段测序结果正确.SDS-PAGE电泳分析得到目的蛋白41 kD,经过Western blot鉴定正确.ELISA检测证实咖啡豆α-半乳糖苷酶具有生物活性.结论:优化诱导条件,初步证实重组咖啡豆α-半乳糖苷酶基因具有生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹林盛	军事医学科学院野战输血研究所	64	450	11.0	19.0
2	杨军	军事医学科学院野战输血研究所	15	143	6.0	11.0
3	崔玉	军事医学科学院野战输血研究所	3	9	2.0	3.0