紫花苜蓿ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 王瑜 袁庆华
• 来源期刊: 草地学报
• 学科: 农学
• 关键词: 紫花苜蓿 ISSR PCR反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 212-215
• 页数: 4页
• 分类号: S812|Q943
• 字数: 3210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11733/j.issn.1007-0435.2007.03.003

摘要

通过优化影响紫花苜蓿(Medicago sativa L.)ISSR-PCR的主要参数,建立适于紫花苜蓿的ISSR反应体系和扩增程序.在20μL体系中各反应物的最适含量为:15 ng模板DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.4 μmol/L ISSR引物,0.8 U Taq DNA聚合酶,2 μL 10×PCR Buffer,1.5 mmol/L MgCl2,2.5%去离子甲酰胺.PCR扩增程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,62℃(62℃～58℃)退火45 s,72℃延伸1 min 45 s,共11个循环,每个循环退火温度降1℃;94℃变性30 s,52℃(52℃～48℃)退火45 s,72℃延伸1 min 45 s,共24个循环;72℃延伸5 min,25℃保温.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁庆华	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	114	1720	21.0	34.0
2	王瑜	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	74	503	14.0	18.0